Kerja enzim dipengaruhi oleh berbagai faktor lingkungan, di antaranya adalah suhu, pH, konsentrasi substrat, konsentrasi enzim, dan keberadaan inhibitor atau aktivator. Suhu yang terlalu tinggi dapat menyebabkan denaturasi enzim, sedangkan pH yang tidak optimal dapat mengubah bentuk aktif enzim. Konsentrasi substrat yang rendah membatasi kecepatan reaksi, sementara inhibitor dapat menghambat kerja enzim secara kompetitif atau non-kompetitif. Memahami faktor-faktor ini penting untuk mengoptimalkan reaksi enzimatik dalam berbagai aplikasi.