Ayam mutiara memiliki ciri khas yang unik, dan membedakan antara jantan dan betina memerlukan pengamatan yang cermat. Perbedaan utama terletak pada ukuran pial (gelambir di bawah paruh), di mana jantan biasanya memiliki pial yang lebih besar dan lebih menonjol. Selain itu, suara ayam jantan cenderung lebih keras dan nyaring dibandingkan betina. Perilaku juga dapat menjadi indikator, dengan ayam jantan seringkali lebih agresif dan dominan.